머리말
실험실에서의 안전수칙


제 1 장
박테리아 배양과 plasmid vector


실험 1. 박테리아 배양 배지 34
실험 2. Pure박테리아의 분리 및 배양 43
실험 3. 세균 수의 측정 49
실험 4. 박테리아 세포의 성장 및 균주(strain) 보관법 56
실험 5. 접합(conjugation) 63
실험 6. 박테리아 세포로부터 plasmid DNA의
추출과 정제 66
실험 7. 핵산과 단백질의 농도 측정 75
실험 8. Agarose gel electrophoresis 79
실험 9. Agarose gel 로부터 fragmented DNA의 recovery 및 정제 86
실험 10. Plasmid vector를 이용한 subcloning 90
실험 11. Recombinant Plasmid DNA의 형질전환 98
실험 12. 형질전환체의 고등생물체로의 형질전환 및 분석 105
실험 13. β-galactosidase enzyme의 induction 118
실험 14. Recombinant plasmid DNA의 탐지와 제한효소
지도 작성 121


제 2 장
DNA와 바이오테크놀러지


실험 15. 진핵생물로부터 Genome DNA의 추출 129
실험 16. 진핵 DNA의 부분적인 제한효소 절단 133
실험 17. Southern Hybridization 135
실험 18. In situ hybridization 141
실험 19. 법의학적 측면에서의 fingerprinting 148
실험 20. 중합효소연쇄반응(PCR, Polymerase Chain Reaction) 157
실험 21. UV에 의한 DNA 손상 및 광회복 161


제 3 장
RNA


실험 22. 고등생물 조직으로부터 total RNA의 추출 164
실험 23. mRNA(poly(A)+)의 정제 및 분리 172
실험 24. Northern hybridization 176
실험 25. RNA의 Dot and slot hybridization 184


제 4 장
Protein의 정제와 Expression


실험 26. Tyrosinase 단백질의 추출 및 정제 188
실험 27. Tyrosinase 효소의 생화학적 특성 195
실험 28. 박테리아(E.coli)에서의 fusion protein(cloned genes) 의 제조 199
실험 29. SDS-Polyacrylamide Gel electrophoresis 205
실험 30. Western blotting 213
실험 31. Translation of mRNA 222
실험 32. 목표 단백질에 대한 Immunoprecipitation 227
실험 33. 효소에 결합한 면역흡착제 분석법- ELISA(Enzyme-Linked
ImmunoSorvent Assay)반응 233


제 5 장
Bacteriophage λ를 이용한 molecular cloning


실험 34. Bacteriophage λ에 대한 plaque의 분리 237
실험 35. single plaque으로부터 bacteriophage λ stock의 제조 241
실험 36. 소규모 bacteriophage λ에 대한 liquid culture의 제조 245
실험 37. Bacteriophage λ DNA의 제조 248
실험 38. Bacteriophage λ DNA의 제한효소에 의한 digestion 251
실험 39. Bacteriophage λ DNA arms의 정제 254
실험 40. Bacteriophage λ vector의 alkaline phosphatase
효소로의 처리 258
실험 41. Bacteriophage λ의 foreign DNA fragment와의 ligation and packaging 261



부록


부록 1. 분자생물학 관련용액제조 267
부록 2. 분자생물학 물질의 단위들 278
부록 3. 완충용액 279
부록 4. 압력을 온도로 환산하는 법 282
부록 5. 정상인의 소변 성분표 283
부록 6. 유용한 web sites 284
부록 7. 생명공학 정보 web sites 287

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